如何用最簡單的HE染色方法輕松獲取明亮的顯微鏡圖像

作為廣泛應(yīng)用于組織學(xué)及細(xì)胞學(xué)領(lǐng)域的染色方法，HE染色法以其簡便易行的優(yōu)勢成為了制備顯微鏡樣本圖片的首選。但如何通過這種方法獲取清晰鮮艷的圖片，卻是常常令人頭痛難解的問題。下面，就讓我們來探討一下如何用最簡單的HE染色方法輕松獲取明亮的顯微鏡圖像。

1. 樣本處理技巧

HE染色法是一種比較基礎(chǔ)的熒光顯微鏡染色方法，能夠有效地染色細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)等常見的細(xì)胞結(jié)構(gòu)。在樣本處理過程中，首先應(yīng)該注意到樣本的完整性，不能有明顯的損傷或破壞；其次需要進(jìn)行足夠的清洗和固定，以便有效地去除細(xì)胞表面的油脂和雜質(zhì)，避免染色質(zhì)量的不穩(wěn)定性；最后應(yīng)該在特定的溫度和pH條件下進(jìn)行染色，提高染色效果和質(zhì)量。

2. 染色方法精細(xì)化要求

在HE染色方法中，將組織切片或細(xì)胞載玻片固定后進(jìn)行蘇木精染色處理，然后將其穿過幾種不同濃度的酒精和丙酮進(jìn)行去水，再進(jìn)行伊紅染色，最后清洗過幾次水，就可以用封片液來封裝玻片。從整個(gè)操作流程上來說，要注意下列細(xì)節(jié)：

- 細(xì)胞質(zhì)和核的染色顏色應(yīng)該區(qū)分清晰，掌握好蘇木精染色處理的時(shí)間；

- 不同生物樣本染色溫度、濃度和pH值各不相同，在染色前充分了解生物樣本的特殊情況；

- 充分去水是確保染色質(zhì)量的關(guān)鍵，快速處理以避免過度去水和暴露；

- 伊紅染色后，樣本不應(yīng)過長時(shí)間地曝露于空氣中，保持恰當(dāng)脫水然后封樣；

3. 顯微鏡成像方法調(diào)整

通過HE染色法制備出來的樣本顯微鏡圖像，如果沒有進(jìn)行適當(dāng)?shù)某上裾{(diào)整和優(yōu)化，可能會失去染色的效果。不僅僅要調(diào)整顯微鏡的亮度、對比度和飽和度等參數(shù)，還要進(jìn)行儀器的調(diào)校和分析。確保顯微鏡的鏡頭平整光潔，同時(shí)調(diào)節(jié)成像的目鏡和物鏡的距離。

嘗試掌握這些細(xì)節(jié)，進(jìn)行科學(xué)的實(shí)驗(yàn)操作，才能更好地了解生物樣本的結(jié)構(gòu)和組成，同時(shí)有效地提高實(shí)驗(yàn)效率。