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飽和油紅O染液產(chǎn)品說明書.pdf

產(chǎn)品簡介

油紅O又名蘇丹紅5B，是一種脂溶性偶氮染料。該染料能特異性使細胞或組織內(nèi)的甘油三脂等中性脂質(zhì)著色，對于磷脂和類固醇等染色較弱，基本原理是油紅O溶于脂質(zhì)中使脂質(zhì)呈現(xiàn)紅色至橘紅色。

本產(chǎn)品飽和油紅O染液，是油紅O的飽和溶液，使用前經(jīng)純水稀釋后，可用于冰凍切片組織或細胞爬片的染色，經(jīng)工作液染色后的組織內(nèi)的脂滴呈深紅色至橘紅色不等。

儲存與運輸

常溫避光保存與運輸，有效期12個月。

使用方法

1. 配制工作液：臨用前取6份飽和油紅O染液與4份蒸餾水充分混合均勻，室溫靜置8-16h，用抽濾儀過濾一次，即為油紅工作液。工作液需及時使用，不可放置過夜，否則會影響染液效價。

2. 需自備試劑：60%異丙醇(用于分化油紅o)。

3. 樣本準備

細胞爬片：吸棄細胞培養(yǎng)液，沿孔板邊緣緩慢加入PBS。加入2-3ml的4%多聚甲醛固定液，室溫固定10-15 min，PBS漂洗2次。

 冰凍切片：切片從-20℃取出后室溫靜置10-15 min恢復至常溫。

染色步驟

對于細胞爬片

（1）孔板內(nèi)加入少量60%異丙醇覆蓋細胞15-20 s，吸棄60%異丙醇，稍微晾干水分。

（2）向孔板內(nèi)加入油紅O工作液2-3ml（對于細胞爬片，配制好工作液最好2h內(nèi)使用，時間放置越久，顏色易變淡）覆蓋細胞，室溫避光染色15-30 min，吸棄染色液。

（3）立即加入60%異丙醇快速分化3-5 s，純水洗3次，每次5 min。

（4）（可選）加入蘇木素染液對細胞核進行染色10-15s，水洗，返藍后再水洗2次。

（5）取出爬片，有細胞的一面朝下，滴加甘油明膠封片劑進行封片。

 對于冰凍切片

(1) 恢復至室溫的冰凍切片輕輕浸入油紅O工作液浸染8-10 min（加蓋避光）。

(2) 取出切片，稍瀝干3 s后依次浸入兩缸60%異丙醇分化，每缸5-10 s。

(3) 切片依次浸入兩缸純水中浸洗，每次10 s。

(4) （可選）切片浸入蘇木素染液對細胞核進行染色，水洗，返藍再水洗，稍微晾干水分后滴加甘油明膠封片劑封片。

注意事項

1. 樣品為新鮮組織冰凍切片，切好后的切片需先進行固定，后再染色，固定樣品與新鮮樣品形態(tài)有所差異。

2. 油脂密度小，易產(chǎn)生移位，操作過程動作盡量輕柔，可稍微緩解脂肪的丟失或者移位。

3. 封片后油紅O樣本不能長期保存，應盡快進行多層掃描或者拍照留存圖片，否則易析出結(jié)晶。

4. 甘油明膠封片劑封片時需注意，盡量避免產(chǎn)生氣泡。

5. 本產(chǎn)品100ml染液大約可用于80張切片的染色。當組織或細胞著色明顯偏淺或顏色異常時請更換新的染液。

6. 為了您的安全和健康，操作時請穿實驗服并佩戴一次性手套。

本產(chǎn)品僅供科研使用，不用于臨床診斷！

（ 產(chǎn)品包裝升級中，請以實物為準）