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實(shí)驗(yàn)介紹:
克隆形成實(shí)驗(yàn)是腫瘤細(xì)胞學(xué)研究中的一種常用技術(shù),其原理是將細(xì)胞分離成單細(xì)胞懸液,在培養(yǎng)基上接種培養(yǎng),根據(jù)集落形成數(shù)量和大小來檢測細(xì)胞增殖能力和致瘤性。該實(shí)驗(yàn)可用來研究腫瘤細(xì)胞的增殖能力、侵襲性,探討細(xì)胞對(duì)不同殺傷因素的敏感性。
實(shí)驗(yàn)過程:
根據(jù)培養(yǎng)基是否需要軟瓊脂,克隆形成實(shí)驗(yàn)可以分為平板克隆形成實(shí)驗(yàn)(PCF)和軟瓊脂克隆形成實(shí)驗(yàn)(SACF)。PCF是直接將細(xì)胞接種于培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿中,優(yōu)點(diǎn)為操作簡便、細(xì)胞間分泌的促生長因子可在培養(yǎng)液中擴(kuò)散、克隆形成率高,適用于貼壁生長的細(xì)胞; 缺點(diǎn)為細(xì)胞在 貼壁前易于移動(dòng)。SACF 是采用半固體培養(yǎng)基模擬體內(nèi)生長環(huán)境,適用于懸浮細(xì)胞及不依賴于貼壁生長的腫瘤細(xì)胞。在懸浮狀態(tài)下不能增殖的細(xì)胞(如正常成纖維細(xì)胞)不適用此法
結(jié)果展示: