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1.實(shí)驗(yàn)介紹
油紅O對(duì)脂滴的染色機(jī)制一般認(rèn)為是物理學(xué)上的溶液作用或吸附作用,借溶液作用使脂質(zhì)染色,即油紅O先溶于60%異丙醇中,然后切片浸入油紅O染液中時(shí),油紅O在組織脂質(zhì)的溶解度較60%異丙醇中的溶解度高,所以在染色時(shí)油紅O從60%異丙醇中轉(zhuǎn)移入脂質(zhì)中使脂滴顯示紅色。
2.實(shí)驗(yàn)流程
冰凍切片:冰凍切片自然晾干→油紅染色→分化→蘇木素染核→分化→返藍(lán)→甘油明膠封片。
爬片:多聚甲醛固定15min→PBS洗2次→破膜液破膜→油紅染色→分化→蘇木素染核→分化→返藍(lán)→甘油明膠封片。
3.注意事項(xiàng)
(1)樣品固定要求:樣本放置于20倍樣本體積的固定液中固定24h以上,固定時(shí)樣品切勿冷凍結(jié)冰。
(2)運(yùn)輸要求:固定好的樣品常溫運(yùn)輸送樣;
(3)冰凍切片-20℃運(yùn)輸,細(xì)胞爬片經(jīng)多聚甲醛固定15min以上后封口,常溫運(yùn)輸。
4.圖片
肝(200*):
肺(200*)
腎(200*)
爬片(200*)
脂肪(200*)