1.實驗介紹
三磷酸腺苷酶水解三磷酸腺苷和磷酸,并放出能量。磷酸和鈉離子結合,在酶活性處形成無色的磷酸鈣,磷酸鈣經(jīng)氯化鈷處理形成磷酸鈷,再經(jīng)硫化銨處理形成棕黑色的硫化鈷沉淀在酶活性部位。用堿作前孵育處理時,僅白肌纖維出現(xiàn)陽性反應,這對肌球蛋白ATP酶來說是特異性的
2.實驗流程
冰凍切片:冰凍切片自然晾干→ATP孵育液染色→酒精脫水→封片。
3.注意事項
(1)樣本固定要求:無需固定。肌肉組織離體后,擦干表面血水,液氮速凍,-80保存。
(2)運輸要求:干冰運輸。
4.圖片
大鼠肌肉(40*):