實(shí)驗(yàn)介紹：

透射電子顯微鏡（transmission electron microscope，TSE）是利用透射電子成像，因而要求樣品極薄厚度不能超100nm。其結(jié)構(gòu)包括三大部分：電子學(xué)系統(tǒng)、真空系統(tǒng)和電子光學(xué)系統(tǒng)；掃描電子顯微鏡 (scanning electron microscopy，SEM) 是利用聚焦的非常細(xì)的高能電子束在試樣上掃描，激發(fā)出各種物理信息。通過對(duì)這些信息的接受、放大和顯示成像，獲得測(cè)試樣表面形貌的觀察。其結(jié)構(gòu)由真空系統(tǒng)，電子束系統(tǒng)以及成像系統(tǒng)組成。  

實(shí)驗(yàn)流程：

透射電鏡： 樹脂包埋—制片—拍照 

掃描電鏡：脫水-干燥-噴金-拍照

實(shí)驗(yàn)結(jié)果展示：

透射電鏡： 

線粒體                                             膽固醇結(jié)晶                                     肥大細(xì)胞

掃描電鏡：

 納米材料                                         真菌孢子鏈                                     細(xì)胞

皮諾飛電鏡送樣單

下附電鏡樣本準(zhǔn)備方法及要求，如因前期樣本準(zhǔn)備出現(xiàn)問題或未詳細(xì)填寫送樣單中樣品

下附電鏡樣本準(zhǔn)備方法及要求，如因前期樣本準(zhǔn)備出現(xiàn)問題或未詳細(xì)填寫送樣單中樣品

內(nèi)容及要求，或者實(shí)驗(yàn)本身存在定位或易降解等方面異常難度，導(dǎo)致結(jié)果圖片與預(yù)期結(jié)果不符的，我司一概不接受退單。

透射電鏡樣本準(zhǔn)備方法及要求

以下所有樣本必須盡量新鮮，固定液或懸浮液都不得冷凍結(jié)冰！

1、動(dòng)物組織樣本

①1-3min內(nèi)取樣，取樣組織米粒大小，盡量薄。（盡量保持在1-3mm3，電鏡所用固定劑穿透力較弱，為了與固定液的穿透速率相適應(yīng)，樣品塊的大小不得超過此范圍，以確保固定效果）。

②由于電鏡觀察范圍有限，要求取材時(shí)盡量精確到需要觀察的目的部位，然后在同一個(gè)部位取3～5塊樣品（如觀察腎小球取腎皮質(zhì)；觀察胰島取胰島豐富的胰尾；皮膚，腸胃等在固定液中易打卷的組織可將組織粘在濾紙上進(jìn)行固定）。

③取材時(shí)一定注意避免鑷子擠壓等機(jī)械損傷，刀片要鋒利避免挫傷組織。

④ 組織取下后立即投入電鏡固定液內(nèi)室溫固定2h，再轉(zhuǎn)移至4℃保存，4℃冰袋運(yùn)輸，在保存和運(yùn)輸過程中固定液切勿冷凍結(jié)冰。

2、植物組織樣本

①取材要求同動(dòng)物組織樣本。

②組織投入固定液后需要進(jìn)行真空抽氣讓組織沉底，如無(wú)條件抽氣可用濾紙將組織塞進(jìn)固定液內(nèi)，組織不能漂浮在固定液表面。

3、細(xì)胞樣本

貼壁細(xì)胞：（對(duì)細(xì)胞外形沒有要求且實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c細(xì)胞膜無(wú)關(guān)）

培養(yǎng)好的細(xì)胞棄培養(yǎng)基，加入胰酶消化。 胰酶消化好后（時(shí)間不宜過長(zhǎng)），加培養(yǎng)基終止消化，吸管輕輕吹打至細(xì)胞起浮。吸入離心管，低速離心（不超過3000轉(zhuǎn)），2min左右，細(xì)胞團(tuán)要有綠豆大??；棄上清，加入電鏡固定液（固定液需提前恢復(fù)至室溫），細(xì)胞團(tuán)吹散重懸，室溫避光固定30min，再轉(zhuǎn)移至4℃保存，4℃冰袋運(yùn)輸，在保存和運(yùn)輸過程中固定液切勿冷凍結(jié)冰。

（對(duì)細(xì)胞外形有要求且實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c細(xì)胞膜有關(guān)）

培養(yǎng)好的細(xì)胞棄培養(yǎng)基，加入電鏡固定液（固定液需提前恢復(fù)至室溫），常溫避光固定5min左右，用細(xì)胞刮（或軟橡膠蓋切得平整小方塊）沿一個(gè)方向輕輕刮下細(xì)胞，切記不要反復(fù)刮，避免細(xì)胞刮破，然后用巴氏吸管把細(xì)胞液吸入離心管內(nèi)，放入離心機(jī)（不超過3000轉(zhuǎn)），低速離心2min左右，細(xì)胞團(tuán)要有綠豆大小，棄固定液后加新的電鏡固定液，細(xì)胞團(tuán)吹散重懸；室溫避光固定30min，再轉(zhuǎn)移至4℃保存，4℃冰袋運(yùn)輸，在保存和運(yùn)輸過程中固定液切勿冷凍結(jié)冰。

懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞要肉眼可見細(xì)胞沉淀芝麻至綠豆大小，棄培養(yǎng)基后加電鏡固定液室溫避光固定2h，再轉(zhuǎn)移至4℃保存，4℃冰袋運(yùn)輸，在保存和運(yùn)輸過程中固定液切勿冷凍結(jié)冰。

4、細(xì)菌樣本

長(zhǎng)于固體培養(yǎng)基的細(xì)菌：連帶著培養(yǎng)基一起挑下細(xì)菌放于電鏡固定液內(nèi)室溫固定2h，再轉(zhuǎn)移至4℃保存， 4℃冰袋運(yùn)輸，在保存和運(yùn)輸過程中固定液切勿冷凍結(jié)冰。

懸浮細(xì)菌孢子等：離心收集細(xì)菌要肉眼可見細(xì)菌沉淀芝麻至綠豆大小，棄培養(yǎng)基后加電鏡固定液室溫固定2h，再轉(zhuǎn)移至4℃保存，4℃冰袋運(yùn)輸，在保存和運(yùn)輸過程中固定液切勿冷凍結(jié)冰。

5、病毒

破碎組織細(xì)胞，粗離心去除細(xì)胞碎片取上清，超速離心分離出病毒（病毒提取的過程需要客戶自己完成）。用緩沖液（如PBS）懸浮病毒，4℃保存運(yùn)輸，盡快滴片做負(fù)染后及時(shí)電鏡觀察拍照。

6、外泌體囊泡等

客戶自己完成外泌體囊泡等的提取收集，用緩沖液（如PBS）懸浮，4℃保存運(yùn)輸，盡快制片做負(fù)染后及時(shí)電鏡觀察拍照。（因此類樣品極易降解，樣品越新鮮越好，數(shù)小時(shí)內(nèi)完成滴片負(fù)染，否則做出的效果很不理想甚至完全觀察不到）

7、納米材料等無(wú)機(jī)材料

直接準(zhǔn)備粉劑或用緩沖液（如PBS）懸浮，常溫保存運(yùn)輸即可。做負(fù)染后電鏡觀察拍照。