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Opal 工作原理
多標(biāo)記免疫熒光染色存在諸多困難,例如抗體種屬交叉反應(yīng)、多輪處理后的標(biāo)簽穩(wěn)定性、高低信號(hào)之間的平衡以及弱表達(dá)標(biāo)記物的檢
測(cè)等。因而在 FFPE 組織或冷凍切片中檢測(cè)三種或更多生物標(biāo)記物成為限制研究者的一大障礙。
Opal 是利用TSA 技術(shù)開發(fā)的多標(biāo)記復(fù)染方案,利用TSA 信號(hào)不受微波影響,并能在抗體去除后保留信號(hào)的原理。可以為組織樣品特
別是 FFPE (福爾馬林固定石蠟包埋)樣品進(jìn)行染色,并且允許在同一樣本中 使用同一種屬來(lái)源的不同一抗進(jìn)行多標(biāo)記識(shí)別。配合
Vectra多光譜成像分析系統(tǒng),可以獲得高信噪比(扣除 背景熒光)的圖像和進(jìn)行精準(zhǔn)的批量定量分析。
Opal 獨(dú)特優(yōu)勢(shì)
◆同一切片實(shí)現(xiàn)多達(dá)7種生物標(biāo)記染色(含核染)
◆檢測(cè)靈敏度較普通 IHC 提高近100倍
◆可使用同一種屬來(lái)源的一抗,且無(wú)干擾
◆降低一抗使用量從而節(jié)約成本
◆微波去除一抗/二抗干擾
◆洗脫去非特異性染色
實(shí)驗(yàn)原理
Opal 是一套基于酪酰胺信號(hào)放大技術(shù)(TSA,TyramideSignal Amplification)的多標(biāo)記免疫組化染色方案,為組織樣品特別是 FFPE
(福爾馬林固定石蠟包埋)樣品進(jìn)行染色,并且允許同一樣本中使用同一種屬來(lái)源 的不同一抗進(jìn)行多標(biāo)記復(fù)合染色。配合多光譜成像
分析系統(tǒng),可以獲得高信噪比(扣除背景自發(fā)熒光)的圖像, 甚至是多達(dá)7種標(biāo)記的同步染色和共定位及定量分析。